Terreni disidratati
Sorbitol Peptone Broth And Bile Salts (PSB) ISO
Per l'arricchimento selettivo di Yersinia enterocolitica.
- Codice
- LC-1298
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- BAMISO 10273ISO 11133
Sorbitol Peptone Broth and Bile Salts (PSB) è un terreno raccomandato dalla norma ISO 10273 per l'arricchimento selettivo di Yersinia enterocolitica nei campioni alimentari. I focolai di gastroenterite associati a Yersinia enterocolitica sono in aumento. Prodotti alimentari contaminati come la carne di maiale e di manzo e il latte crudo e trattato sono stati identificati come fonti di infezione.
Caratteristiche principali
Arricchimento selettivo di Yersinia enterocolitica.
Alimenti.
BAM, ISO 10273, ISO 11133.
31 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il digerito enzimatico di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone. Il sorbitolo è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,6 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 31 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Digerito enzimatico di caseina | 5 |
| Sali biliari | 1,5 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Diidrogenofosfato di sodio | 1,2 |
| Idrogenofosfato di sodio | 8,23 |
| Sorbitolo | 10 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 31 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Secondo ISO 10273
Rilevazione di Yersinia enterocolitica secondo ISO 10273:
- Ottenere la sospensione iniziale. Aggiungere una porzione da analizzare di 25 g o 25 mL a 225 g o 225 mL di Sorbitol Peptone Broth and Bile Salts (PSB), in modo da ottenere una diluizione decimale, e omogeneizzare.
- Inoculare la sospensione (semina diretta) su 2-4 piastre dell'agar selettivo Yersinia Selective Agar (CIN).
- Trasferire la sospensione iniziale in PSB, terreno liquido di arricchimento, nel terreno di arricchimento selettivo ITC (Irgasan Ticarcillin and Potassium Chlorate Broth) (LC-1361) e incubare i due terreni liquidi di arricchimento alla temperatura di 25 °C per 44 ore.
- Seminare l'arricchimento dopo il trattamento con KOH (mescolando 0,5 mL di arricchimento in 4,5 mL di soluzione di KOH allo 0,5 % per 20 s) su piastre di Yersinia Selective Agar (CIN).
- Incubare le piastre di Yersinia Selective Agar (CIN) a 30 °C per 24 ore.
- Verificare con colture successive su piastre selettive la morfologia delle colonie di Y. enterocolitica patogena presunta. Le colonie tipiche di Y. enterocolitica appaiono incolori, con il centro rosso scuro, a occhio di bue, circondate da un bordo trasparente.
- Confermare la presenza delle specie patogene di Y. enterocolitica con una prova di conferma biochimica o molecolare.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 25 ± 1 °C / 44 ± 4 h.
Condizioni di inoculo: microrganismi bersaglio (< 100 UFC) / microrganismi non bersaglio (> 1000 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC).
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Yersinia enterocoliticaATCC 23715 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | > 10 colonie caratteristiche su CIN Agar | Colonie caratteristiche secondo CIN Agar |
| Yersinia enterocoliticaCECT 9144 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | > 10 colonie caratteristiche su CIN Agar | Colonie caratteristiche secondo CIN Agar |
Bibliografia
- ISO 10273 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica.
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