Terreni disidratati
Irgasan Ticarcillin and Potassium Chlorate Broth (ITC) ISO
Per l'arricchimento selettivo di Yersinia enterocolitica.
- Codice
- LC-1361
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 10273ISO 11133
Irgasan Ticarcillin and Potassium Chlorate Broth (ITC) è raccomandato dalla norma ISO 10273 come brodo di arricchimento selettivo per la rilevazione del ceppo patogeno per l'uomo di Yersinia enterocolitica nei campioni di alimenti e di acque.
Supplemento da aggiungere: ITC Supplement LC-6051
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento selettivo di Yersinia enterocolitica.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 10273, ISO 11133.
Preparazione
44,0 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il digerito enzimatico di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il cloruro di magnesio e il verde malachite rendono il brodo altamente selettivo. L'irgasan inibisce i batteri Gram-positivi, la ticarcillina ha un'azione battericida sui batteri Gram-negativi e Gram-positivi e il clorato di potassio ha una proprietà disinfettante.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige chiaro |
| Colore del terreno preparato | Blu-verde |
| pH finale (25 °C) | 6,9 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 44,0 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Digerito enzimatico di caseina | 10 |
| Cloruro di magnesio anidro | 28,1 |
| Verde malachite | 0,01 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Estratto di lievito | 1 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 44,0 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 47 °C e aggiungere in condizioni asettiche due fiale di ITC Supplement (LC-6051). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori sterili.
Secondo ISO 10273
Rilevazione di Yersinia enterocolitica secondo ISO 10273:
- Preparare la sospensione iniziale. Aggiungere una porzione da analizzare di 25 g o 25 mL a 225 g o 225 mL di Sorbitol Peptone Broth and Bile Salt (PSB) (LC-1298), in modo da ottenere una diluizione decimale, e omogeneizzare.
- Inoculare la sospensione (semina diretta) su 2-4 piastre di agar selettivo Yersinia Selective Agar (CIN) (LC-1126).
- Trasferire la sospensione iniziale nel terreno di arricchimento liquido PSB al terreno di arricchimento selettivo Irgasan Ticarcillin and Potassium Chlorate Broth (ITC) e incubare i due terreni liquidi di arricchimento alla temperatura di 25 °C per 44 ore.
- Seminare l'arricchimento con il trattamento con KOH (mescolando 0,5 mL di arricchimento in 4,5 mL di soluzione di KOH allo 0,5 % per 20 s) su piastre di Yersinia Selective Agar (CIN).
- Incubare le piastre di Yersinia Selective Agar (CIN) a 30 °C per 24 ore.
- Verificare la morfologia delle colonie come Y. enterocolitica patogena presunta con colture successive su piastre selettive. Le colonie tipiche di Y. enterocolitica appaiono incolori, con il centro rosso scuro, come un occhio di bue, circondate da un bordo trasparente.
- Confermare la presenza di specie patogene di Y. enterocolitica con una prova di conferma biochimica o molecolare.
Controllo qualità
Secondo ISO 10273
Condizioni di incubazione: 25 ± 1 °C / 44 ± 4 h.
Condizioni di inoculo: microrganismi bersaglio (< 100 UFC) / microrganismo non bersaglio (> 1000 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC).
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Yersinia enterocoliticaATCC 23715 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | > 10 colonie caratteristiche su CIN Agar | Colonie caratteristiche secondo ciascun terreno |
| Proteus mirabilisATCC 29906 | Inibizione totale (0) o inibizione parziale (< 10 colonie) su TSA | |
| Yersinia enterocoliticaCECT 9144 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | > 10 colonie caratteristiche su CIN Agar | Colonie caratteristiche secondo ciascun terreno |
Bibliografia
- ISO 10273 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica.
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