ITC Supplement

Descrizione

Il digerito enzimatico di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il cloruro di magnesio e il verde malachite rendono il brodo altamente selettivo. L'irgasan inibisce i batteri Gram-positivi, la ticarcillina ha un'azione battericida sui batteri Gram-negativi e Gram-positivi e il clorato di potassio ha una proprietà disinfettante.

Tecnica

Ricostituire in modo asettico 1 fiala con 10 mL di acqua distillata sterile. Mescolare delicatamente fino a completa dissoluzione e aggiungere in modo asettico a 500 mL di Irgasan Ticarcillin and Potassium Chlorate Broth (ITC) ISO (LC-1361), autoclavato e raffreddato a 50 °C. Mescolare bene e distribuire in contenitori sterili.

Istruzioni per l'uso

Per la rilevazione di Yersinia enterocolitica secondo ISO 10273:

• Per ottenere la sospensione iniziale, mescolare 25 g del campione con 225 mL di PSB (LC-1298) portato a temperatura ambiente.
• Preparare la sospensione in Irgasan Ticarcillin and Potassium Chlorate Broth (ITC) (LC-1361) trasferendo 10 mL di PSB in 90 mL di terreno ITC.
• Con la sospensione iniziale in PSB, ripartire 1 mL tra 2-4 piastre di CIN Agar (LC-1126) e distribuirlo sulla superficie della piastra con una spatola. Incubare a 30 °C per 24 ± 2 ore.
• Incubare entrambe le sospensioni a 25 °C per 44 ± 4 ore.
• Trasferire 0,5 mL di ogni sospensione in 4,5 mL di soluzione di KOH (separatamente) preparata il giorno prima. Inoculare entrambe le soluzioni su piastre di CIN Agar.
• Incubare le piastre capovolte a 30 °C per 24 ± 2 ore.
• Verificare con colture successive su piastre selettive la morfologia delle colonie di Y. enterocolitica patogena presunta. Le colonie tipiche di Y. enterocolitica appaiono incolori, con il centro rosso scuro, a occhio di bue, circondate da un bordo trasparente.
• Confermare la presenza delle specie patogene di Y. enterocolitica con prove di conferma biochimiche o molecolari.

Ricostituire la fiala liofilizzata originale aggiungendo 10 mL di acqua distillata sterile.

Nota: ogni fiala è sufficiente per integrare 500 mL di ITC Broth.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Aggiungere 1 fiala a 500 mL di terreno base. NON RISCALDARE dopo l'aggiunta del supplemento.

Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).

Aerobiosi. Incubazione a 25 ± 1 °C, lettura a 44 ± 4 h.

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

• ISO 10273 Standard. (2003) Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal methods for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica.
• ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• American Public Health Association Compendium of Methods for the microbiological Examination of Foods.
• Schiemann, D.A. Synthesis of a selective agar medium for Yersinia enterocolitica. Canad. J. Microbiol. 25: 1298-1304.