XLT4 Supplement

Descrizione

Hanno riportato l'isolamento di Salmonella non tifoidee da campioni di pollo e da campioni ambientali di allevamento prelevati con tamponi a trascinamento, da campioni molto contaminati. XLT4 Agar si può usare in ambito clinico per esaminare i campioni di feci alla ricerca di Salmonella non tifoidee.

Questo terreno permette la crescita ottimale di Salmonella. In questo terreno la differenziazione di Salmonella dagli altri microrganismi si basa sulla fermentazione dei carboidrati (lattosio, xilosio, saccarosio), con la conseguente produzione di acido solfidrico. La produzione di H₂S si rileva con la reazione del sale di ferro: le colonie appaiono nere o con il centro nero. Il tiosolfato di sodio e il citrato ferrico ammonico sono gli indicatori di H₂S. I batteri che decarbossilano la L-lisina a cadaverina si riconoscono dalla presenza di un colore rosso porpora intorno alle colonie, dovuto all'innalzamento del pH. Il rosso fenolo è l'indicatore di pH. Il tiosolfato di sodio è aggiunto anche come fonte di zolfo inorganico. L'estratto di lievito e il peptone sono una fonte di azoto e di aminoacidi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Le colonie tipiche di Salmonella (H₂S-positive) appaiono nere o con il centro nero, con un alone giallo, dopo 18-48 ore di incubazione a una temperatura di 35 ± 2 °C. Continuando l'incubazione, le colonie diventano completamente nere oppure da rosa a rosse con il centro nero. Le colonie dei ceppi di Salmonella H₂S-negativi appaiono di colore rosa-giallo.

La maggior parte delle colonie di Citrobacter è gialla, senza segni di annerimento. La crescita di Enterobacter aerogenes e di Escherichia coli è nettamente inibita; le colonie che crescono in questo terreno appaiono gialle, senza segni di annerimento. La crescita di Proteus, Pseudomonas e Yersinia enterocolitica è da nettamente a completamente inibita. Le specie di Shigella sono parzialmente inibite e le colonie appaiono rosse.

Tecnica

Aggiungere 4,6 mL di supplemento XLT4 a 1 L di XLT4 Agar Base (LC-1159). Mescolare bene e scaldare agitando spesso fino a completa dissoluzione. Far bollire per un minuto. EVITARE IL SURRISCALDAMENTO. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Distribuire in contenitori sterili.

Istruzioni per l'uso

• Inoculare il campione in un terreno di pre-arricchimento, come Tetrathionate Broth (LC-1114).
• Incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
• Seminare per spatolamento o per striscio il campione del terreno di arricchimento sulla superficie di XLT4 Agar Base.
• Incubare in aerobiosi a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-48 ore.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Distribuire in piastre il terreno completo, raffreddato a 50 °C.

Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).

Metodologia analitica secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.

Aerobiosi. Incubazione a 35 ± 2 °C, lettura a 18-48 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• Miller, R. G., and C. R. Tate. 1990. XLT4: A highly selective plating medium for the isolation of Salmonella. The Maryland Poultryman, April:2-7.
• Tate, C. R., R. G. Miller, and E. T. Mallinson. 1992. Evaluation of two isolation and two non-isolation methods for detecting naturally occurring salmonellae from broiler flock environmental drag-swab samples. J. Food Prot. 55:964-967.
• Dusch, H., and M. Altwegg. 1995. Evaluation of five new plating media for the isolation of Salmonella species. J. Clin. Microbiol. 33:802-804.