Terreni disidratati
EE Broth
Per la rilevazione e la conta delle Enterobacteriaceae con il metodo MPN.
- Codice
- LC-1362
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 8 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 11133
EE Broth è un terreno raccomandato per rilevare e contare le Enterobacteriaceae con il metodo MPN (metodo del numero più probabile).
Caratteristiche principali
Applicazioni
Rilevazione e conta non selettiva degli enterobatteri.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 11133.
Preparazione
43,5 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, evitare di surriscaldare, non sterilizzare.
Principio e uso
Il digerito pancreatico di gelatina e il glucosio sono le fonti di azoto e di energia. La bile di bue disidratata e il verde brillante inibiscono i batteri Gram-positivi e la maggior parte dei batteri Gram-negativi. Il fosfato di sodio e il fosfato di potassio agiscono come sistema tampone.
La norma ISO 21528-1:2004 descrive un metodo, con prearricchimento, per la rilevazione delle Enterobacteriaceae. Si può applicare ai prodotti destinati al consumo umano e all'alimentazione degli animali, e ai campioni ambientali dell'area di produzione e di manipolazione degli alimenti. Questo metodo si usa quando si prevede che i microrganismi ricercati abbiano bisogno di rivitalizzazione prima dell'arricchimento e quando si prevede che il loro numero sia compreso tra 1 e 100 per millilitro o per grammo di campione.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Verde chiaro |
| Colore del terreno preparato | Verde |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 43,5 g |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Verde brillante | 0,0135 |
| Fosfato disodico | 6,45 |
| Digerito pancreatico di gelatina | 10 |
| Glucosio monoidrato | 5 |
| Fosfato monopotassico | 2 |
| Bile di bue disidratata | 20 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 43,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE. Raffreddare subito sotto l'acqua corrente, senza contaminare il terreno. Distribuire in contenitori adatti.
Istruzioni per l'uso
- Diluire il campione (1:10) in Buffered Peptone Water (BPW).
- Incubare la sospensione iniziale a 37 °C per 18 ± 2 ore.
- Trasferire 1 mL di questa sospensione in 10 mL del terreno di arricchimento EE Broth.
- Incubare a 37 °C per 24 ± 2 ore.
- Inoculare su un terreno solido selettivo e incubare la piastra a 37 °C per 24 ± 2 ore.
- Conferma e conta.
Controllo qualità
Secondo ISO 11133
Condizioni di incubazione: 37 ± 1 °C / 24 ± 2 h.
Condizioni di inoculo: produttività qualitativa (< 100 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC) / specificità (10³-10⁴ UFC).
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Escherichia coliATCC 8739 + Enterococcus faecalis ATCC 19433 | ≥ 10 colonie su VRBG | Colonie da rosa a rosse, con o senza alone di precipitazione |
| Escherichia coliATCC 8739 + Enterococcus faecalis ATCC 29212 | ≥ 10 colonie su VRBG | Colonie da rosa a rosse, con o senza alone di precipitazione |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 + Enterococcus faecalis ATCC 19433 | ≥ 10 colonie su VRBG | Colonie da rosa a rosse, con o senza alone di precipitazione |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 + Enterococcus faecalis ATCC 29212 | ≥ 10 colonie su VRBG | Colonie da rosa a rosse, con o senza alone di precipitazione |
| Enterococcus faecalisATCC 19433 | Inibizione totale (0) | |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | Inibizione totale (0) |
Bibliografia
- ISO 21528-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal methods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae - Part 1: Detection and enumeration by MPN technique with pre-enrichment.
- Department of Health NHS Executive: The Caldicott Committee. Report on the review of patient identifiable information. London. December 1997.
- The European Parliament and the Council of the European Union. Regulation (EC) No 852/2004 of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 on the hygiene of foodstuffs. Official Journal of the European Union. L226.
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