Terreni per biologia molecolare
Vegetable LB Broth (Lennox)
Terreno raccomandato per il mantenimento e la coltivazione di ceppi ricombinanti di E. coli.
- Codice
- LC-2038
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Vegetable LB Broth (Lennox) è un terreno nutrizionalmente ricco basato su LB Broth (Lennox) (LC-1231), progettato come alternativa ai classici terreni a base di componenti di origine animale per la crescita e il mantenimento di colture pure di ceppi ricombinanti di E. coli usati nelle procedure di microbiologia molecolare.
Caratteristiche principali
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Terreni di coltura per biologia molecolare.
20 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Questi ceppi derivano in genere da E. coli K12, che non sono in grado di produrre la vitamina B, perciò questo terreno è formulato per favorire la crescita dei microrganismi con esigenze nutrizionali elevate. Questo ceppo di E. coli è stato ulteriormente modificato con una mutazione specifica, per creare un ceppo auxotrofo che non è in grado di crescere su terreni nutrizionalmente carenti.
In questo caso gli ingredienti sono privi di componenti di origine animale, per ridurre al minimo il rischio di encefalopatia spongiforme bovina nei terreni di coltura che contengono materiali di origine bovina. Il peptone di origine vegetale fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico.
Vegetable LB Broth (Lennox) ha un contenuto di cloruro di sodio diverso da quello di altri terreni come Luria Broth (Miller LB Broth) (LC-1551) o Luria Broth (Miller’s Modification) (LC-1266). Questo permette di scegliere la concentrazione di sale ottimale del terreno per un ceppo specifico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Beige limpido |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 20 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Cloruro di sodio | 5 |
| Estratto di lievito | 5 |
| Peptone vegetale | 10 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 20 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione e distribuire in provette. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- Ausubel, Brent, Kingston, Moore, Seidman, Smith and Struhl (ed.). 1994. Current protocols in molecular biology, vol. 1. Green Publishing Associates, Inc., Brooklyn, N.Y.
- Mackenzie E.F.N., Taylor E.N. and Gilbert W.E. 1948. Recent experiences in the rapid identification of E. coli, type I. J. Gen. Microbiol. 2:197-204.
- Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
- Lennox. (1955). Virology 1:190.
- Sambrook, Fritsch and Maniatis. (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.
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