DNA polimerasi
AccuPOL DNA Polymerase
DNA polimerasi termostabile ad alta fedeltà con correzione di bozze, per ampliconi a estremità piatte
- Codice
- A210002
- Categoria
- DNA polimerasi
- Formati
- 8 formati
- Produttore
AccuPOL DNA Polymerase è una DNA polimerasi termostabile ad alta fedeltà derivata da Pyrococcus furiosus, fornita a 2,5 U/µL. Accanto all'attività polimerasica 5'-3' possiede un'attività esonucleasica 3'-5' di correzione di bozze, che rimuove le basi incorporate in modo errato e restituisce ampliconi con pochissimi errori. I prodotti di PCR hanno estremità piatte, per cui l'enzima è indicato quando servono alta fedeltà o estremità blunt, ad esempio in clonaggio, studi di mutazione, espressione genica e costruzione di librerie. È disponibile da solo oppure in kit con 10x Ammonium Buffer e MgCl2 25 mM.
Caratteristiche principali
Tasso di errore di 1,1 x 10⁻⁶ nel saggio lacIOZ, contro 18 x 10⁻⁶ della Taq DNA polimerasi nelle stesse condizioni.
L'attività esonucleasica 3'-5' corregge gli appaiamenti errati durante la sintesi del filamento.
Genera prodotti di PCR blunt-end, adatti alle applicazioni che richiedono estremità piatte.
Nei test di validazione ha amplificato in modo specifico bersagli da circa 200 bp a oltre 3 kb, con contenuto in GC fra 30% e 65%.
Applicazioni
- PCR ad alta fedeltà
- Clonaggio, anche a estremità piatte
- Studi di mutazione
- Studi di espressione genica
- Costruzione di librerie
- Reazioni di estensione del primer
Specifiche tecniche
| Concentrazione | 2,5 U/µL |
|---|---|
| Attività | Polimerasica 5'-3' ed esonucleasica 3'-5' (correzione di bozze) |
| Fedeltà | Tasso di errore 1,1 x 10⁻⁶ (saggio lacIOZ) |
| Lunghezza dell'amplicone | Fino a 3 kb |
| Estremità del prodotto | Piatte (blunt) |
| Tempo di estensione | 1-2 min/kb (minimo 1 minuto) |
| Tampone di conservazione | 50 mM Tris-HCl pH 8,5, 0,1 mM EDTA, 1,0 mM DTT, 0,1% polisorbato 20, 50% glicerolo |
| Fornito con | Versione con buffer: 10x Ammonium Buffer (15 mM MgCl2) e MgCl2 25 mM; versione senza buffer: solo enzima |
| Definizione di unità | 1 unità incorpora 10 nmol di dNTP in DNA precipitabile in acido in 30 minuti a 72 °C |
| Conservazione | -20 °C a lungo termine; 4 °C fino a 6 mesi |
| Spedizione | In ghiaccio secco |
| Controllo qualità | Testato per l'assenza di attività endonucleasiche e di nicking contaminanti |
Cosa ricevi
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