DNA polimerasi
GC-rich DNA Target Kit
Kit hot start con due tamponi dedicati per amplificare e ottimizzare bersagli di DNA ricchi in GC
- Codice
- A227103
- Categoria
- DNA polimerasi
- Formati
- 1 formato
- Produttore
Il GC-rich DNA Target Kit è studiato per l'amplificazione di sequenze di DNA ricche in GC e per individuare le condizioni migliori prima di passare alle master mix pronte GC TEMPase. Comprende in provette separate TEMPase Hot Start DNA Polymerase (5 U/µL), i due tamponi 4x GC Buffer I e GC Buffer II e MgCl2 25 mM, così da confrontare i tamponi e regolare il magnesio. La polimerasi è una Taq modificata chimicamente: resta inattiva a temperatura ambiente e si attiva con uno step iniziale di 15 minuti a 95 °C.
Caratteristiche principali
Due tamponi per DNA GC-rich
GC Buffer I e GC Buffer II consentono di testare in parallelo due condizioni ottimizzate per bersagli con alto contenuto in GC.
Hot start chimico
Un gruppo chimico blocca il sito attivo fino all'attivazione termica, evitando l'estensione di primer appaiati in modo aspecifico durante l'allestimento.
Allestimento a temperatura ambiente
Le reazioni si preparano senza ghiaccio, a tutto vantaggio della praticità.
Resa e specificità elevate
Alta sensibilità e resa con formazione ridotta di prodotti aspecifici.
Applicazioni
- Amplificazione di bersagli di DNA ricchi in GC
- Ottimizzazione di saggi PCR non riusciti con tamponi standard
- Scelta del tampone prima del passaggio alle master mix GC TEMPase
- PCR da DNA genomico, plasmidico e batterico
Specifiche tecniche
| Polimerasi | TEMPase Hot Start DNA Polymerase, 5 U/µL (Taq modificata chimicamente) |
|---|---|
| Composizione | 100 µL di enzima, 1,5 mL di 4x GC Buffer I, 1,5 mL di 4x GC Buffer II, 1,5 mL di MgCl2 25 mM |
| MgCl2 nei tamponi GC | 6 mM nel tampone 4x, pari a 1,5 mM nella reazione |
| Attivazione | 15 minuti a 95 °C |
| Estensione | Circa 1.000 basi al minuto a 72 °C |
| Tampone di conservazione dell'enzima | 20 mM Tris-HCl pH 8,9, 100 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,5% polisorbato 20, 50% glicerolo |
| Definizione di unità | 1 unità incorpora 10 nmol di dNTP in DNA precipitabile in acido in 30 minuti a 72 °C |
| Conservazione | -20 °C a lungo termine; 4 °C fino a 6 mesi |
| Spedizione | In ghiaccio secco |
| Controllo qualità | Enzima testato per l'assenza di attività endonucleasiche, di nicking ed esonucleasiche contaminanti |
Cosa ricevi
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