Bacillus Cereus Selective Agar Base (MYP) ISO

L'estratto di manzo e il peptone forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il mannitolo è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia; Bacillus cereus è mannitolo-negativo. Il contenuto di mannitolo permette di identificare la flora di accompagnamento mannitolo-positiva, caratterizzata da un colore giallo. Il rosso fenolo è l'indicatore di pH. L'agar batteriologico è l'agente solidificante. Bacillus cereus produce lecitinasi. I prodotti di degradazione insolubili della lecitina presente nel tuorlo d'uovo si accumulano intorno alle colonie di Bacillus cereus, formando un precipitato bianco.

LC-1343, versione ISO

Bacillus Cereus Selective Agar Base (MYP) è un terreno raccomandato dalla norma ISO 7932 per la conta presuntiva di Bacillus cereus con la tecnica di conta su piastra a 30 °C.

L'estratto di manzo e il digerito enzimatico di caseina forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il mannitolo è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia; Bacillus cereus è mannitolo-negativo. Il contenuto di mannitolo permette di identificare la flora di accompagnamento mannitolo-positiva, caratterizzata da un colore giallo. Il rosso fenolo è l'indicatore di pH. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Bacillus cereus è resistente a certe concentrazioni di polimixina, che inibisce la flora di accompagnamento ed è efficace soprattutto contro i microrganismi Gram-negativi. Bacillus cereus produce lecitinasi. I prodotti di degradazione insolubili della lecitina del tuorlo d'uovo si accumulano intorno alle colonie di Bacillus cereus, formando un precipitato bianco.

Le colonie presuntive sono grandi, rosa (a indicare che non è avvenuta la fermentazione del mannitolo) e in genere circondate da una zona di precipitazione (a indicare la produzione di lecitinasi).

LC-1343, versione ISO

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

LC-1343, versione ISO

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 43 grammi di terreno in 900 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in condizioni asettiche 100 mL di Egg Yolk Emulsion (LC-5152) e, se si desidera, aggiungere in condizioni asettiche 2 fiale di Bacillus Cereus Supplement (LC-6021). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori adatti.

Istruzioni per l'uso

Metodo di semina per striscio:

1. In una piastra di Petri, aggiungere 12-15 mL di agar fuso e lasciar solidificare.
2. Inoculare 10 µL della sospensione iniziale e/o del campione diluito.
3. Distribuire l'inoculo sulla superficie dell'agar con un'ansa sterile.
4. Incubare le piastre capovolte a una temperatura di 35 ± 2 °C per 24-40 ore.

LC-1343, versione ISO

Sospendere 46 grammi di terreno in 900 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 44-47 °C e aggiungere in condizioni asettiche 100 mL di Egg Yolk Emulsion (LC-5152) e 2 fiale di Bacillus Cereus Supplement (LC-6021). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori adatti.

Per la conta di Bacillus cereus presuntivo secondo ISO 7932:

1. Trasferire 0,1 mL del campione o della sospensione iniziale su ciascuna di due piastre di agar. Preparare diluizioni decimali, se necessario.
2. Quando, per alcuni prodotti, si vuole stimare un basso numero di B. cereus, i limiti di rilevazione si possono aumentare di un fattore 10, esaminando 1,0 mL del campione se il prodotto iniziale è liquido, o 1,0 mL della sospensione iniziale per gli altri prodotti.
3. Distribuire 1 mL di inoculo sulla superficie di una piastra di Petri grande (140 mm) o sulla superficie di tre piastre piccole (90 mm), con una spatola sterile. In entrambi i casi, preparare dei duplicati usando due piastre grandi o sei piastre piccole.
4. Le piastre inoculate vanno incubate da 18 a 24 ore a 30 °C. Se le colonie non sono chiaramente visibili, incubare le piastre per altre 24 ore prima della conta.

LC-1343, versione ISO

• Donovan, K.O.: A Selective Medium for Bacillus cereus in Milk, J. appl. Bact., 21; 100:103 (1958)
• Mossel, D.A.A., Koopman, M.J. and Jongerius, E.: Enumeration of Bacillus cereus in Foods. Appl. Microbiol., 15; 650:653 (1967)
• International Standard ISO 7932 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus - Colony-count technique at 30 °C.