Terreni disidratati
Bacillus Cereus Selective Agar Base (PEMBA) ISO
Per la conta e l'isolamento di Bacillus cereus negli alimenti.
- Codice
- LC-1125
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 11133ISO 21871
Bacillus Cereus Selective Agar Base (PEMBA) è stato adattato alle esigenze nutritive di Bacillus cereus ed è stato proposto per la conta, la rilevazione e l'isolamento di Bacillus cereus negli alimenti. Questo batterio è resistente a certe concentrazioni di polimixina, che inibisce la flora di accompagnamento ed è efficace soprattutto contro i microrganismi Gram-negativi. Questo terreno è raccomandato dalla norma ISO 21871 per la determinazione di bassi numeri di Bacillus cereus.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva di Bacillus cereus.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 11133, ISO 21871.
Preparazione
40 g in 950 mL di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il peptone di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il piruvato di sodio riduce la dimensione delle colonie dei microrganismi. Il blu di bromotimolo agisce da indicatore di pH per rilevare la fermentazione del mannitolo. Il mannitolo è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia; Bacillus cereus è mannitolo-negativo. Il contenuto di mannitolo permette di identificare la flora di accompagnamento mannitolo-positiva. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico del terreno. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Bacillus cereus produce lecitinasi. I prodotti di degradazione insolubili della lecitina del tuorlo d'uovo si accumulano intorno alle colonie di Bacillus cereus, formando un precipitato bianco. Le colonie di Bacillus cereus appariranno blu, circondate da una zona di opacità nel terreno.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Crema bluastro |
| Colore del terreno preparato | Blu grigiastro |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità | 40 g in 950 mL |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Digerito enzimatico di caseina | 1 |
| Blu di bromotimolo | 0,12 |
| Agar batteriologico | 14 |
| D-mannitolo | 10 |
| Solfato di magnesio eptaidrato | 0,1 |
| Diidrogenofosfato di potassio | 0,25 |
| Cloruro di sodio | 2 |
| Idrogenofosfato di sodio | 2,5 |
| Piruvato di sodio | 10 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 40 grammi di terreno in 950 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in condizioni asettiche 50 mL di Egg Yolk Emulsion (LC-5152) e, se si desidera, aggiungere in condizioni asettiche 2 fiale di Bacillus Cereus Supplement (LC-6021). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori adatti.
Secondo ISO 21871
Per la conta di bassi numeri di Bacillus cereus secondo ISO 21871:
- Arricchimento nel terreno liquido selettivo TSPB: 3 provette con 10 mL di terreno a doppia concentrazione e 3 provette con 9 mL di terreno a concentrazione semplice.
- Inoculare le provette a doppia concentrazione con 10 mL della sospensione iniziale del campione da analizzare e inoculare le provette a concentrazione semplice con 1 mL della sospensione iniziale o delle diluizioni successive.
- Incubare a 30 °C per 48 ± 4 ore.
- Agitare delicatamente le provette e inoculare Selective Agar for Bacillus Cereus (PEMBA) con un'ansa da semina (10 µL).
- Incubare le piastre capovolte a 37 °C per 18-24 ore. Se le colonie non sono state identificate correttamente, continuare l'incubazione per altre 24 ore.
- Esaminare le piastre per rilevare la presenza di colonie.
Controllo qualità
Secondo ISO 11133
Condizioni di incubazione: produttività (21 ± 3 - 44 ± 4 h / 37 ± 1 °C) / specificità, selettività (44 ± 4 h / 37 ± 1 °C).
Condizioni di inoculo: produttività qualitativa (10³-10⁴ UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC) / specificità (10³-10⁴ UFC).
Terreno di riferimento: TSA.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Bacillus cereusATCC 11778 | Crescita buona (2) | Colonie turchesi con alone di precipitazione |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale (0) | |
| Bacillus subtilisATCC 6633 | Crescita buona | Colonie bianche senza alone di precipitazione |
Bibliografia
- Donovan, K.O.: A Selective Medium for Bacillus cereus in Milk, J. appl. Bact., 21; 100:103 (1958)
- Mossel, D.A.A., Koopman, M.J. and Jongerius, E.: Enumeration of Bacillus cereus in Foods. Appl. Microbiol., 15; 650:653 (1967)
- ISO 21871 Horizontal method for the determination of low numbers of presumptive Bacillus cereus.
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