Endo LES Agar

Descrizione

La selettività moderata è dovuta alla formazione di un composto fucsina-solfito. Questo composto reagisce con l'acetaldeide formata nella fermentazione del lattosio e libera il colorante fucsina, che colora la colonia batterica. I ceppi che producono grandi quantità del metabolita, come E. coli, possono cristallizzare la fucsina sulla colonia, dando origine al caratteristico riflesso verde metallico.

Le colonie di coliformi, che fermentano il lattosio, sono da rosa a rosso pallido, con o senza riflesso verde metallico: può verificarsi un marcato arrossamento del terreno. Le colonie degli altri bacilli enterici, compresa Salmonella, e dei non fermentanti il lattosio hanno all'incirca lo stesso colore del terreno, da quasi incolori a rosa tenue.

Attenzione: con l'esposizione all'ossigeno il terreno in piastra diventa gradualmente rosso per l'ossidazione del solfito e quindi non si può più usare. Il terreno ossidato (rosso molto intenso) non va usato, perché la produttività del terreno diminuisce.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi da filtrare secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Filtrare il campione su una membrana con pori da 0,45 µm e porla sulla superficie dell'agar.

Incubare le piastre in aerobiosi a 36 ± 1 °C per 18-24 h.

(A seconda del campione, delle specifiche, ecc., possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.)

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie sviluppate sulla membrana.

Calcolare la carica microbica totale per mL di campione moltiplicando il numero medio di colonie per membrana per l'inverso del fattore di diluizione. Riportare i risultati come unità formanti colonia (UFC) per mL, insieme al tempo e alla temperatura di incubazione.

È necessaria la conferma di E. coli (colonie rosso scuro con un caratteristico riflesso metallico).

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Filtrazione su membrana / intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC per la selettività.

Aerobiosi. Incubazione a 37 ± 1 °C, lettura dopo 24 ± 3 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• APHA/AWWA/WEF (1985) Standard Methods for the examination of water and wastewater. 15th ed. APHA Washington. DC. USA.
• APHA (1967) Standard methods for the examination of dairy products. 12th ed. APHA Washington. DC. USA.
• ATLAS, R.M. (1995) Handbook of Microbiological Media for the Examination of Food. CRC Press. Boca Raton. Fla. USA.
• ATLAS, R.M. & R.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press. London.
• ENDO, S. (1904) Über ein verfahren zum Nachweis von typhusbazillen. Zbl. Bakt. Hyg. Abt. I Orig. 35:109.
• ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• WINDLE TAYLOR, E. (1958) The examination of water and water supplies. 7th ed. Churchill Ltd. London.