Thyoglicollate Fluid Medium EP/USP/ISO

Descrizione

I gruppi -SH di queste sostanze inattivano anche l'arsenico, il mercurio e altri composti di metalli pesanti. I terreni al tioglicolato sono quindi adatti all'esame di materiali che contengono metalli pesanti o conservanti a base di metalli pesanti.

In questa formulazione si usa un agar speciale ad alta viscosità ma con torbidità molto bassa. Si raccomanda un raffreddamento molto lento, per evitare la stratificazione. La maggiore viscosità del terreno liquido al tioglicolato impedisce un rapido assorbimento di ossigeno. Ogni aumento del contenuto di ossigeno è segnalato dall'indicatore redox resazurina sodica, che vira al rosa.

Tecnica

Per l'inoculo delle provette seguire il metodo standard del laboratorio o le norme applicabili (inoculo per infissione, inoculo con l'ansa, serie di diluizioni, ecc.).

La metodologia è conforme ai metodi standard descritti nella Farmacopea.

Inoculare il terreno di coltura con il materiale del campione, facendo in modo che il campione raggiunga il fondo della provetta.

Incubare per almeno 14 giorni alla temperatura ottimale. Gli anaerobi crescono nella parte inferiore del contenitore del terreno di coltura.

Precauzioni e limiti della procedura:

• Conservare il terreno preparato al riparo dalla luce, a temperatura ambiente.
• Se prima dell'uso più del 30 % del terreno è rosa, riscaldare una volta a 100 °C per eliminare l'ossigeno assorbito.
• Non riscaldare il terreno più di una volta: il riscaldamento ripetuto dà origine a tossicità.
• A causa della variabilità nutrizionale, alcuni ceppi possono crescere poco o non crescere in questo terreno.
• Alcuni organismi che fermentano il glucosio, in grado di abbassare il pH del terreno fino a un livello critico, possono non sopravvivere in questo terreno. Per isolare questi organismi è necessario un trapianto precoce.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Inoculo: 50-100 UFC (produttività) secondo la Farmacopea Europea armonizzata e la norma ISO 11133.

Aerobiosi. Incubazione a 30-35 °C per 18-72 h (batteri) e a 20-25 °C per 3-5 giorni (muffe e lieviti).

Cl. perfringens ATCC 13124 a 37 °C, lettura dopo 24 ± 3 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 14 giorni a 22,5 ± 2 °C: NESSUNA CRESCITA.

Incubazione 14 giorni a 32,5 ± 2 °C: NESSUNA CRESCITA.

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