Terreni cromogenici
Violet Red Bile with Lactose Agar + MUG
Per la rilevazione dei coliformi e la rilevazione fluorogenica di Escherichia coli.
- Codice
- LC-1313
- Categoria
- Terreni cromogenici
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 12 mesi
Violet Red Bile with Lactose Agar + MUG è un terreno selettivo usato per la rilevazione dei coliformi e la rilevazione fluorogenica di Escherichia coli.
Caratteristiche principali
Rilevazione dei coliformi e di Escherichia coli.
Alimenti, acque.
39,6 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, non surriscaldare né sterilizzare in autoclave.
Principio e uso
Violet Red Bile Agar with MUG è indicato in molte procedure per la conta dei coliformi negli alimenti e nei prodotti lattiero-caseari. L'aggiunta di MUG a Violet Red Bile Agar permette di rilevare E. coli tra le colonie di coliformi.
Il peptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il lattosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. I sali biliari e il cristal violetto inibiscono i batteri Gram-positivi. Il rosso neutro è un indicatore di pH. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'enzima che scinde il MUG è altamente specifico per E. coli e rende possibile la rilevazione simultanea dei coliformi totali e di E. coli. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Conviene usare il metodo per inclusione: porre 1 mL della diluizione desiderata in una piastra di Petri sterile, aggiungere 15 mL di terreno raffreddato a 45-50 °C e ruotare delicatamente prima di lasciar solidificare. Una volta solidificato, versare un secondo strato di terreno fino a uno spessore di 5 mm. Lasciar solidificare. Incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore. Osservare le piastre alla luce UV (366 nm). La fluorescenza azzurra indica la presenza di E. coli.
I microrganismi che fermentano il lattosio formano colonie rosse con aloni rosso porpora. Occasionalmente i cocchi del tratto intestinale possono svilupparsi come piccole colonie rosse puntiformi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige rossastro |
| Colore del terreno preparato | Rosso porpora |
| pH finale (25 °C) | 7,4 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 39,6 g |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 13 |
| Sali biliari n. 3 | 1,5 |
| Cristal violetto | 0,0024 |
| Lattosio | 10 |
| Peptone di carne | 7 |
| Rosso neutro | 0,03 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Estratto di lievito | 3 |
| MUG (4-metilumbelliferil-beta-D-glucuronide) | 0,1 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 39,6 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Raffreddare a 45 °C e distribuire subito. NON SURRISCALDARE né sterilizzare in autoclave.
Istruzioni per l'uso
Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Escherichia coliATCC 11775 | Crescita buona | Colonie rosse, precipitato (+), fluorescenza (+) |
| Shigella flexneriATCC 12022 | Crescita buona | Colonie incolori, fluorescenza (-) |
| Klebsiella aerogenesATCC 13048 | Crescita buona | Colonie rosse, precipitato (+), fluorescenza (-) |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 | Crescita buona | Colonie incolori, fluorescenza (-) |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Inibizione totale |
Bibliografia
- D.A. Mossel, (1985) Media for Enterobacteriaceae (Inst. J. Food Microbiol 2:27).
- ISO 21528. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal methods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae.
- ISO 7402 Microbiology - General guidance for the enumeration of Enterobacteriaceae without resuscitation - MPN technique and colony-count technique.
- ISO 8523 Microbiology - General guidance for the detection of Enterobacteriaceae with pre-enrichment.
- European Pharmacopoeia 7.0.
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