Terreni disidratati
Vogel-Johnson Agar
Per l'isolamento selettivo di Staphylococcus aureus da campioni alimentari.
- Codice
- LC-1079
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Vogel-Johnson Agar è un terreno selettivo e differenziale usato per la rilevazione precoce di Staphylococcus aureus, identificando i ceppi coagulasi-positivi che fermentano il mannitolo.
Caratteristiche principali
Isolamento selettivo di Staphylococcus aureus.
Alimenti.
60 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti, aggiungere 6 mL di Potassium Tellurite 3,5% (LC-5208).
Principio e uso
S. aureus riduce il tellurito di potassio a tellurio metallico, con la conseguente crescita di colonie nere. La fermentazione del mannitolo è indicata dalle zone gialle intorno alle colonie nere e fa virare al giallo il colore rosso del terreno. Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il mannitolo è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il tellurito di potassio, il cloruro di litio e l'alta concentrazione di glicina inibiscono la maggior parte dei microrganismi diversi dagli stafilococchi. Il rosso fenolo è l'indicatore di pH. Il fosfato dipotassico è un tampone. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Le piastre di Vogel-Johnson Agar si possono seminare abbondantemente per striscio con un tampone e incubare a 35 ± 2 °C per 24-48 ore. Cercare colonie nere circondate da una zona gialla. Nelle prime 24 ore la maggior parte dei microrganismi, tranne gli stafilococchi coagulasi-positivi, è inibita del tutto o in modo marcato. A 48 ore cominciano a comparire molti stafilococchi coagulasi-negativi, mannitolo-positivi e mannitolo-negativi. Staphylococcus epidermidis, quasi sempre inibito all'inizio, forma piccole colonie nero-grigiastre senza zone gialle. Gli stafilococchi coagulasi-positivi formano colonie nere sul terreno rosso. Se fermentano il mannitolo, le colonie sono circondate da una zona gialla. I microrganismi mannitolo-negativi non cambiano il colore rosso del terreno.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Rosa |
| Colore del terreno preparato | Rosso |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 60 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Fosfato dipotassico | 5 |
| D-mannitolo | 10 |
| Glicina | 10 |
| Rosso fenolo | 0,025 |
| Triptone | 10 |
| Estratto di lievito | 5 |
| Cloruro di litio | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 60 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in asepsi 6 mL di Potassium Tellurite 3,5% (LC-5208). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in piastre di Petri. Per preparare un terreno meno selettivo, aggiungere solo 3 mL di Potassium Tellurite 3,5%.
Istruzioni per l'uso
Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 24-48 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Staphylococcus epidermidisATCC 12228 | Crescita moderata | Colonie nere/traslucide |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale | |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita buona | Colonie nere con aloni gialli |
| Proteus mirabilisATCC 25933 | Crescita scarsa/inibita | Colonie nere |
Bibliografia
- United States Pharmacopoeia XXI (1985) Microbial limit tests. Rockville Md.
- Vogel R.A. and Johnson M.J. (1961) Pub. Hlth. Lab, 18, 131.
- Zebovitz E., Evans J.B. and Niven C.P. (1955) J. Bact. 70. 687.
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