Terreni pronti all'uso
Bacillus Cereus Selective Agar (MYP)
Terreno solido selettivo, secondo Mossel, per l'isolamento e l'identificazione di Bacillus cereus da campioni di alimenti, secondo le norme ISO.
- Codice
- LC-945
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- ISO 7932
La formulazione di Mossel è stata sviluppata per rilevare e contare B. cereus in qualsiasi alimento. È sia selettiva sia differenziale per questo microrganismo. L'aggiunta di polimixina inibisce la maggior parte dei batteri accompagnatori, ma non influisce sulla crescita di B. cereus. Questo batterio non fermenta il mannitolo e quindi intorno alle colonie il colore dell'indicatore non cambia. L'attività lecitinasica di B. cereus produce un alone o una zona di precipitato bianco intorno alle colonie.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva di Bacillus cereus.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 7932.
Presentazione
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Descrizione
Una conta di B. cereus superiore a 100.000 cellule/g di campione di alimento è considerata pericolosa, perché la fosforilcolina accumulata può causare sintomi tossici nei bambini. Per questo bisogna eseguire una conta delle cellule vitali per valutare la popolazione reale di cellule.
Tecnica
Per l'inoculo delle piastre seguire i metodi standard del laboratorio o le norme applicabili (tra questi: metodo di semina a spirale, metodi ecometrici, semina per striscio, serie di diluizioni, spatolamento con spatola di Drigalski).
Secondo gli autori, i campioni disidratati o secchi vanno trattati nel modo seguente: 20 g di campione si mescolano con 90 mL di Tryptone Water per almeno 1 ora, a temperatura ambiente. Poi aggiungere altri 90 mL di Tryptone Water e omogeneizzare. Se necessario, diluire 1:10. Se necessario, preparare una serie di diluizioni 1/10 usando Tryptone Water come diluente. Con una spatola di Drigalski distribuire aliquote di 0,1 mL sulla superficie delle piastre di agar e lasciare che il terreno assorba le aliquote. Incubare le piastre a 30 °C per 18-24 ore, per permettere la germinazione delle spore, prima di dare i risultati definitivi.
Le colonie sospette hanno questo aspetto: bordi irregolari, colore rosa che diventa porpora al centro, con un alone di precipitato bianco (mannitolo +). Le colonie con alone giallo vanno scartate (mannitolo -).
È possibile confonderle con colonie di altri bacilli Gram-positivi; per questo vanno eseguite prove di conferma, cioè fermentazione del glucosio, degradazione della gelatina e riduzione dei nitrati.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Cellophane singolo. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone di caseina | 10,000 |
| Mannitolo | 10,000 |
| Cloruro di sodio | 10,000 |
| Estratto di carne | 1,000 |
| Rosso fenolo | 0,025 |
| Agar | 12,000 |
| Polimixina B solfato | 100.000 UI |
| Tuorlo d'uovo | 100 mL |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Arancione |
|---|---|
| pH | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).
Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.
Aerobiosi. Incubazione a 30 ± 1 °C, lettura dopo 24-48 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Bacillus cereusATCC 11778, WDCM 00001 | Buona - colonie rosa con alone di precipitazione |
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 | Inibito |
| Bacillus subtilisATCC 6633, WDCM 00003 | Colonie gialle senza alone |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press. London.
- CORRY, J.E.L., G.D.W. CURTIS & R.M. BAIRD. (2003) Handbook of Culture Media for Food Microbiology. Elsevier Sci. B.V. Amsterdam. The Netherlands.
- DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of methods for the microbiological examination of foods. 4th ed. APHA. Washington DC. USA.
- FIL-IDF 181:1998 Provisional Int. Standard. Dried Milk Products. Enumeration of Bacillus cereus - Most probable number technique.
- ISO 7932 Standard (2004) 3rd ed. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus. Colony count technique at 30 °C.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 21871 Standard (2006) Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the determination of low numbers of presumptive Bacillus cereus - Most probable number technique and detection method.
- MOSSEL, D.A.A., KOOPMAN, M.J. & JONGERIUS, E. (1967) Enumeration of Bacillus cereus in foods. Appl. Microbiol. 15:650-653.
- PASCUAL ANDERSON, Mª R. (1992) Microbiología Alimentaria. Díaz de Santos, S.A. Madrid.
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