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Terreni disidratati

Lysine Decarboxylase Medium ISO

Per la conferma biochimica di Salmonella e di Yersinia enterocolitica.

Codice
LC-1176
Formato
500 g
Conservazione
da 2 a 25 °C
Validità minima garantita
15 mesi
Norme
ISO 10273ISO 19250ISO 6579

Lysine Decarboxylase Medium è raccomandato dalle norme ISO 6579 e ISO 19250 per la conferma biochimica di Salmonella, basata sulla decarbossilazione della lisina. È raccomandato anche dalla norma ISO 10273 per la conferma biochimica di Yersinia.

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CodiceFormatoPrezzo
LC-1176500 g

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Caratteristiche principali

Applicazioni

Conferma di Salmonella e di Yersinia enterocolitica.

Settori

Alimenti, acque.

Norme

ISO 10273, ISO 19250, ISO 6579.

Preparazione

9 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, distribuire 5 mL in provette con tappo a vite, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Principio e uso

Quando il terreno è inoculato con un batterio capace di fermentare il destrosio, l'acido prodotto abbassa il pH del terreno e fa virare il colore dell'indicatore dal viola al giallo. La condizione acida stimola anche l'attività decarbossilasica. I batteri che decarbossilano la L-lisina a cadaverina si riconoscono dalla presenza di un colore rosso porpora. La produzione di queste ammine innalza il pH del terreno. Un colore giallo dopo 24 ore indica un risultato negativo, come per Yersinia.

L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita. Il destrosio è il carboidrato fermentabile. Il porpora di bromocresolo è l'indicatore di pH. La lisina si aggiunge per rilevare la produzione dell'enzima specifico.

Specifiche tecniche

SolubilitàSenza residui
AspettoPolvere fine
Colore del terreno disidratatoBeige chiaro
Colore del terreno preparatoViola
pH finale (25 °C)6,8 ± 0,2
Quantità per litro9 g
Conservazioneda 2 a 25 °C

Formula

Componenteg/L
Destrosio1
Porpora di bromocresolo0,015
Estratto di lievito3
Lisina monoidrato5

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione e uso

Preparazione

Sospendere 9 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in quantità di 5 mL in provette con tappo a vite. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Secondo ISO 6579

Secondo ISO 6579, per la conferma di Salmonella spp. negli alimenti, nei mangimi, nelle feci animali e nei campioni ambientali:

  1. Ottenere colonie presuntive dopo aver inoculato il campione in terreni selettivi di isolamento come XLD Agar (LC-1274) o altri terreni complementari (Chromogenic Salmonella Agar (LC-1122), Brilliant Green Agar (LC-1143), Bismuth Sulfite Agar (LC-1011), DCLS Agar (LC-1045), Deoxycholate Citrate Agar (LC-1067), Hektoen Enteric Agar (LC-1030), Salmonella Shigella Agar (LC-1064) e XLT4 Agar (LC-1159)).
  2. Per confermare Salmonella spp., inoculare le colonie presuntive almeno in Triple Sugar Iron Agar (LC-1172), Urea Agar (LC-2180) e Lysine Decarboxylase Medium.
  3. Inoculare Lysine Decarboxylase Medium appena sotto la superficie del terreno liquido.
  4. Incubare a 37 °C per 24 ± 3 h.
  5. La torbidità e un colore viola del terreno dopo l'incubazione indicano una reazione positiva. Un colore giallo indica una reazione negativa.

Secondo ISO 19250

Secondo ISO 19250, per la conferma di Salmonella spp. nei campioni di acqua:

  1. Ottenere colonie presuntive dopo aver inoculato il campione in terreni selettivi di isolamento come XLD Agar (LC-1274) o altri terreni complementari (Brilliant Green Agar (LC-1143) o Bismuth Sulfite Agar (LC-1011)).
  2. Per confermare Salmonella spp., inoculare le colonie presuntive almeno in Triple Sugar Iron Agar (LC-1172), Urea Agar (LC-2180) e Lysine Decarboxylase Medium.
  3. Inoculare Lysine Decarboxylase Medium ben al di sotto della superficie del terreno liquido e incubare a 36 ± 2 °C per 24 ± 3 h.
  4. Le colture tipiche di Salmonella mostrano un colore viola dopo l'incubazione.

Secondo ISO 10273

Secondo ISO 10273, per la conferma di Yersinia enterocolitica:

  1. Ottenere colonie presuntive dopo aver inoculato il campione in un terreno selettivo di isolamento come Selective Agar Base for Yersinia CIN (LC-1126).
  2. Inoculare le colonie in Lysine Decarboxylase Medium appena sotto la sua superficie.
  3. Incubare a una temperatura di 30 °C per 24 ± 2 ore.
  4. La comparsa di un colore viola dopo l'incubazione indica che la reazione è positiva. Se il colore è giallo, la reazione è negativa.

Controllo qualità

Prova microbiologica

Condizioni di incubazione: 37 ± 1 °C / 24 ± 3 h.

MicrorganismoSpecifica
Escherichia coliATCC 11775(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Klebsiella aerogenesATCC 13048(+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido
Salmonella enteritidisATCC 13076(+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido
Salmonella typhimuriumATCC 14028(+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido
Escherichia coliATCC 25922(+/-) Il terreno può essere giallo o viola (leggera decarbossilazione)
Cronobacter sakazakiiATCC 29544(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Proteus mirabilisATCC 29906(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Citrobacter freundiiATCC 43864(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Cronobacter muytjensiiATCC 51329(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Escherichia coliCECT 8296(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Escherichia coliATCC 8739(-) Il terreno vira dal viola al giallo
Vibrio parahaemolyticusCECT 9114(+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido

Bibliografia

  • ISO 6579 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
  • ISO 10273: Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica.
  • Falkow A. S. Clin. Path. 28:598, 1958.
  • Ewing Davis and Deaves, Studies in the Serratia Group. U.S. Dept. H.E.W.C.D.C. Atlanta, 1972.
  • Edwards and Ewing. Identification of Enterobacteriaceae, Burgess Publ. Co. Minneapolis, Minn., 1961.
  • ISO 19250 Water quality - Detection of Salmonella spp.

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