Terreni disidratati
Lysine Decarboxylase Medium ISO
Per la conferma biochimica di Salmonella e di Yersinia enterocolitica.
- Codice
- LC-1176
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 10273ISO 19250ISO 6579
Lysine Decarboxylase Medium è raccomandato dalle norme ISO 6579 e ISO 19250 per la conferma biochimica di Salmonella, basata sulla decarbossilazione della lisina. È raccomandato anche dalla norma ISO 10273 per la conferma biochimica di Yersinia.
Caratteristiche principali
Conferma di Salmonella e di Yersinia enterocolitica.
Alimenti, acque.
ISO 10273, ISO 19250, ISO 6579.
9 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, distribuire 5 mL in provette con tappo a vite, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Quando il terreno è inoculato con un batterio capace di fermentare il destrosio, l'acido prodotto abbassa il pH del terreno e fa virare il colore dell'indicatore dal viola al giallo. La condizione acida stimola anche l'attività decarbossilasica. I batteri che decarbossilano la L-lisina a cadaverina si riconoscono dalla presenza di un colore rosso porpora. La produzione di queste ammine innalza il pH del terreno. Un colore giallo dopo 24 ore indica un risultato negativo, come per Yersinia.
L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita. Il destrosio è il carboidrato fermentabile. Il porpora di bromocresolo è l'indicatore di pH. La lisina si aggiunge per rilevare la produzione dell'enzima specifico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige chiaro |
| Colore del terreno preparato | Viola |
| pH finale (25 °C) | 6,8 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 9 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Destrosio | 1 |
| Porpora di bromocresolo | 0,015 |
| Estratto di lievito | 3 |
| Lisina monoidrato | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 9 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in quantità di 5 mL in provette con tappo a vite. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Secondo ISO 6579
Secondo ISO 6579, per la conferma di Salmonella spp. negli alimenti, nei mangimi, nelle feci animali e nei campioni ambientali:
- Ottenere colonie presuntive dopo aver inoculato il campione in terreni selettivi di isolamento come XLD Agar (LC-1274) o altri terreni complementari (Chromogenic Salmonella Agar (LC-1122), Brilliant Green Agar (LC-1143), Bismuth Sulfite Agar (LC-1011), DCLS Agar (LC-1045), Deoxycholate Citrate Agar (LC-1067), Hektoen Enteric Agar (LC-1030), Salmonella Shigella Agar (LC-1064) e XLT4 Agar (LC-1159)).
- Per confermare Salmonella spp., inoculare le colonie presuntive almeno in Triple Sugar Iron Agar (LC-1172), Urea Agar (LC-2180) e Lysine Decarboxylase Medium.
- Inoculare Lysine Decarboxylase Medium appena sotto la superficie del terreno liquido.
- Incubare a 37 °C per 24 ± 3 h.
- La torbidità e un colore viola del terreno dopo l'incubazione indicano una reazione positiva. Un colore giallo indica una reazione negativa.
Secondo ISO 19250
Secondo ISO 19250, per la conferma di Salmonella spp. nei campioni di acqua:
- Ottenere colonie presuntive dopo aver inoculato il campione in terreni selettivi di isolamento come XLD Agar (LC-1274) o altri terreni complementari (Brilliant Green Agar (LC-1143) o Bismuth Sulfite Agar (LC-1011)).
- Per confermare Salmonella spp., inoculare le colonie presuntive almeno in Triple Sugar Iron Agar (LC-1172), Urea Agar (LC-2180) e Lysine Decarboxylase Medium.
- Inoculare Lysine Decarboxylase Medium ben al di sotto della superficie del terreno liquido e incubare a 36 ± 2 °C per 24 ± 3 h.
- Le colture tipiche di Salmonella mostrano un colore viola dopo l'incubazione.
Secondo ISO 10273
Secondo ISO 10273, per la conferma di Yersinia enterocolitica:
- Ottenere colonie presuntive dopo aver inoculato il campione in un terreno selettivo di isolamento come Selective Agar Base for Yersinia CIN (LC-1126).
- Inoculare le colonie in Lysine Decarboxylase Medium appena sotto la sua superficie.
- Incubare a una temperatura di 30 °C per 24 ± 2 ore.
- La comparsa di un colore viola dopo l'incubazione indica che la reazione è positiva. Se il colore è giallo, la reazione è negativa.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 37 ± 1 °C / 24 ± 3 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 11775 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Klebsiella aerogenesATCC 13048 | (+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido |
| Salmonella enteritidisATCC 13076 | (+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 | (+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido |
| Escherichia coliATCC 25922 | (+/-) Il terreno può essere giallo o viola (leggera decarbossilazione) |
| Cronobacter sakazakiiATCC 29544 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Proteus mirabilisATCC 29906 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Citrobacter freundiiATCC 43864 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Cronobacter muytjensiiATCC 51329 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Escherichia coliCECT 8296 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Escherichia coliATCC 8739 | (-) Il terreno vira dal viola al giallo |
| Vibrio parahaemolyticusCECT 9114 | (+) Il terreno resta viola dopo l'incubazione ed è torbido |
Bibliografia
- ISO 6579 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
- ISO 10273: Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica.
- Falkow A. S. Clin. Path. 28:598, 1958.
- Ewing Davis and Deaves, Studies in the Serratia Group. U.S. Dept. H.E.W.C.D.C. Atlanta, 1972.
- Edwards and Ewing. Identification of Enterobacteriaceae, Burgess Publ. Co. Minneapolis, Minn., 1961.
- ISO 19250 Water quality - Detection of Salmonella spp.
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