Bolton Broth Base ISO

Descrizione

Il peptone di carne e l'idrolizzato di lattoalbumina forniscono il carbonio e l'azoto per la crescita. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico e il carbonato di sodio neutralizza l'acidità prodotta dalla crescita microbica. L'estratto di lievito e l'acido chetoglutarico agiscono da fattori di crescita. L'aggiunta di metabisolfito di sodio, piruvato di sodio ed emina neutralizza i composti tossici che si possono formare nel terreno di coltura per l'azione dell'ossigeno ed evita la necessità di un'atmosfera microaerobica. Il sangue di cavallo lisato è necessario per neutralizzare gli antagonisti del trimetoprim presenti nel terreno.

La selettività della fase di arricchimento è ottimizzata con il supplemento selettivo: la vancomicina è attiva contro i microrganismi Gram-positivi. Il cefoperazone è attivo soprattutto contro i batteri Gram-negativi. Il trimetoprim agisce contro una grande varietà di cellule Gram-positive e Gram-negative, e la cicloesimide o l'amfotericina B sono fungicidi efficaci.

Tecnica

Introdurre una quantità (massa o volume) in nove volte il suo volume di Bolton Selective Enrichment Broth, in modo da ottenere un rapporto campione/terreno di 1:10 (p/v o v/v), e omogeneizzare.

Bolton Selective Enrichment Broth non richiede l'incubazione in ambiente microaerobico, ma va usato in contenitori con tappo a vite, riempiti lasciando uno spazio di testa inferiore a 20 mm e con tappi a chiusura ermetica.

Incubare la sospensione iniziale a 37 °C per 4-6 ore, poi a 41,5 °C per 44 ± 4 ore.

Per le tecniche di isolamento e di identificazione, fare riferimento ai metodi ISO o BAM (Bacteriological Analytical Manual).

Nota: per completare il terreno di coltura, aggiungere il 5 % di sangue di cavallo lisato e Campylobacter Bolton Selective Supplement (LC-6070).

Nota: per completare il terreno di base, aggiungere il 5 % di sangue di cavallo lisato e il supplemento selettivo per Campylobacter secondo Bolton (LC-6070).

LC-4675, flaconi da 125 mL

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Preparare le provette - inoculare con 100 ± 20 UFC per la promozione della crescita o con 10⁴-10⁶ UFC per la selettività.

Microaerofilia. 37 ± 1 °C per 5 ± 1 h; poi 41,5 ± 1 °C per 44 ± 4 h.

Dopo l'incubazione, trapiantare su terreni appropriati.

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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