Lowenstein Jensen Medium Base w/o M.Green

Il glicerolo e la miscela di uova forniscono gli acidi grassi e le proteine necessari per il metabolismo dei micobatteri. La coagulazione dell'albumina dell'uovo durante la sterilizzazione dà un terreno solido per l'inoculo. Il fosfato monopotassico agisce come sistema tampone. Il solfato di magnesio è uno ione magnesio necessario in una grande varietà di reazioni enzimatiche, compresa la replicazione del DNA. Il verde malachite sopprime la crescita dei batteri contaminanti.

Con il 5 % di cloruro di sodio, Lowenstein Jensen Medium si può usare come aiuto nella differenziazione dei micobatteri a crescita rapida da quelli a crescita lenta, in base alla tolleranza al sale.

M. fortuitum, M. triviale, M. chelonei e alcuni ceppi di M. flavescens crescono su questo terreno, mentre la maggior parte degli altri ceppi di micobatteri è inibita.

Lowenstein Jensen Medium in provetta a fondo profondo si può usare come aiuto nella differenziazione dei micobatteri in base alla prova della catalasi. Lowenstein Jensen Medium con antibiotici si può usare per isolare in modo selettivo i micobatteri e inibire la flora contaminante. L'aggiunta di acido ribonucleico a Lowenstein Jensen Medium può aumentare la percentuale di bacilli tubercolari recuperati rispetto al recupero su Lowenstein Jensen Medium standard.

M. bovis non cresce su Lowenstein Jensen Medium contenente glicerolo.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 36,9 grammi di terreno in 550 mL di acqua distillata, con 12 mL di glicerolo (non aggiungere il glicerolo se si devono coltivare bacilli bovini o altri microrganismi glicerofobi). Scaldare agitando spesso e far bollire per un minuto. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 50 °C. Nel frattempo, preparare un litro di uovo intero, ottenuto in condizioni asettiche e mescolato senza introdurre bolle d'aria. Aggiungere lentamente l'uovo alla base, in modo da ottenere una miscela omogenea. Aggiungere alla miscela 0,40 g di verde malachite (sciolto prima in 50 mL di acqua, sterilizzato e raffreddato) e mescolare. Distribuire in provette sterili con tappo a vite. Porre le provette in posizione inclinata. Tindalizzare per l'inspissazione a 85-90 °C per 45 minuti.

Istruzioni per l'uso

Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per un massimo di 28 giorni. La conferma va fatta con prove biochimiche.

La prova microbiologica deve essere eseguita dal laboratorio dell'utilizzatore finale.

• Bailey and Scott. Diagnostic Microbiology. The C.V. Mosby Company, Saint Louis, 1978.
• Diagnostic Procedures and Reagents, APHA. Fifth Ed. 1970. New York.
• Raiza Nikolajuk of Irurzum and A.J.F., Irurzum. The Laboratory in the Diagnostics of Tuberculosis. Ed. Medical Panamericana, Buenos Aires, 1972.