Slanetz-Bartley Medium w/o TTC

Burkwall e Hartman hanno dimostrato che l'aggiunta di 0,5 mL di Tween 80 e di 20 mL di una soluzione al 10 % di carbonato o bicarbonato di sodio a ogni litro di terreno era utile nella ricerca degli enterococchi negli alimenti surgelati.

Il triptosio fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il fosfato dipotassico è un tampone. La sodio azide inibisce i batteri Gram-negativi. Il cloruro di trifeniltetrazolio è ridotto a formazano dagli enterococchi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

La norma ISO 7899-2 raccomanda questo terreno per la conta degli enterococchi nei sistemi idrici. L'acqua si filtra attraverso una membrana, che si pone poi sulla superficie di una piastra di Slanetz-Bartley Medium. La piastra si incuba a 36 ± 2 °C per 44 ± 4 ore. La membrana si esamina con una lente d'ingrandimento sotto una buona luce e tutte le colonie rosse o marroni si contano come enterococchi presunti.

Con un risultato presuntivo positivo, la membrana con le colonie tipiche si trasferisce su una piastra di Bile Esculin Azide Agar (LC-1005) preriscaldata a 44 °C. Le piastre si incubano a 44 ± 0,5 °C per 2 ore. Dopo l'incubazione, le colonie tipiche (colore bruno-nero nel terreno circostante) si contano come enterococchi intestinali.

Questo terreno è conforme anche alle raccomandazioni del Ministero della Salute britannico - Report 71 e alle norme tedesche DIN 10181 e 10160 per l'esame di latte, carne e prodotti a base di carne.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 41,4 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 50-60 °C e, se si desidera, aggiungere in condizioni asettiche 2 fiale di TTC 1% Supplement (LC-6030), ricostituite prima in 5 mL di acqua distillata sterile.

Secondo ISO 7899-2

Per la rilevazione e la conta degli enterococchi secondo ISO 7899-2:

1. Filtrare un volume misurato di acqua attraverso una membrana filtrante.
2. Porre la membrana su una piastra di Slanetz-Bartley Medium.
3. Incubare a 36 ± 2 °C per 44 ± 4 h.
4. Trasferire la membrana con le colonie caratteristiche, incubata prima in Slanetz-Bartley Medium, senza capovolgerla, su una piastra di Bile Esculin Azide Agar (LC-1005) preriscaldata a 44 °C.
5. Incubare a 44 ± 0,5 °C per 2 ore.
6. Leggere subito la piastra.
7. Si considera che le colonie tipiche che mostrano un colore bruno-nero nel terreno circostante diano reazione positiva; si contano come enterococchi intestinali.

• Slanetz L.W. and Bartley C.H. 1957. J. Bact. 74; 591-595.
• ISO 7899-2. Water quality - Detection and enumeration of intestinal enterococci - Part 2: Membrane filtration method.
• Nordic Committee of Food analysis 1968 Leaflet 68.
• Department of Health and Social Security report 711982.
• The Bacteriological examination of drinking water supplies, HMSO, London.