Terreni disidratati
Listeria Fraser Broth with Ferric Ammonium Citrate ISO
Terreno di arricchimento per la rilevazione e la conta di Listeria nei campioni alimentari e ambientali.
- Codice
- LC-2234
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 11133ISO 11290
Listeria Fraser Broth Base si usa per la rilevazione rapida di Listeria da alimenti e campioni ambientali. Gli antibiotici e il citrato ferrico ammonico sono già inclusi nella formula.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento selettivo di Listeria.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 11133, ISO 11290.
Preparazione
57,9 g in 1000 mL di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Le Listeria spp. possono essere presenti in piccolo numero e sono spesso accompagnate da un numero molto più grande di altri microrganismi, perciò è necessario un arricchimento selettivo. Listeria Fraser Broth si usa in questo arricchimento selettivo di Listeria monocytogenes e delle altre specie di Listeria in tutti i tipi di alimenti, compresi il latte e i prodotti lattiero-caseari, e nei campioni ambientali. Questa formula è descritta secondo ISO 11290.
Il digerito enzimatico di caseina, il digerito enzimatico di tessuti animali e l'estratto di carne forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. I fosfati di potassio agiscono come sistema tampone. Tutte le specie di Listeria idrolizzano l'esculina, che reagisce con gli ioni ferrici producendo un annerimento del terreno. L'aggiunta di citrato ferrico ammonico migliora la crescita di Listeria monocytogenes. Il cloruro di litio inibisce la crescita degli enterococchi che possono idrolizzare l'esculina.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 57,9 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Digerito enzimatico di caseina | 5 |
| Acriflavina | 0,025 |
| Esculina | 1 |
| Citrato ferrico ammonico | 0,5 |
| Estratto di manzo | 5 |
| Acido nalidixico | 0,02 |
| Diidrogenofosfato di potassio | 1,35 |
| Cloruro di sodio | 20 |
| Estratto di lievito | 5 |
| Digerito enzimatico di tessuti animali | 5 |
| Cloruro di litio | 3 |
| Idrogenofosfato disodico diidrato | 12 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 57,9 grammi di terreno in 1000 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C. Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori sterili.
Secondo ISO 11290
Rilevazione di Listeria monocytogenes e Listeria spp. secondo ISO 11290:
- Arricchimento primario: pesare 25 g (o 25 mL) di campione e aggiungere 225 mL di Listeria Half Fraser Broth (LC-1183 + LC-6050). Omogeneizzare e incubare a 30 °C per 25 ± 1 ore.
- Arricchimento secondario: inoculare 0,1 mL della coltura incubata in Listeria Half Fraser Broth (qualunque sia il suo colore) in 10 mL di Listeria Fraser Broth. Incubare a 37 °C per 24 ± 2 ore in aerobiosi.
- Semina e identificazione: dalla coltura di arricchimento primario, inoculare la superficie di Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti (LC-1345) e dell'altro terreno selettivo scelto dal laboratorio, per ottenere colonie ben separate. Dalla coltura di arricchimento secondario, ripetere la procedura: inoculare la superficie di Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti e dell'altro terreno selettivo. Per Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti, incubare per un totale di 48 ± 2 h.
- Conferma: selezionare le colonie presuntive ed eseguire le prove di conferma per L. monocytogenes o Listeria spp.
Controllo qualità
Secondo ISO 11133
Condizioni di incubazione: produttività e selettività (37 ± 1 °C / 24 ± 2 h).
Condizioni di inoculo: microrganismi bersaglio (< 100 UFC) / microrganismo non bersaglio (> 1000 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC).
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale su TSA | |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | < 100 colonie su TSA | |
| Listeria monocytogenesATCC 13932 + Escherichia coli ATCC 25922 + Enterococcus faecalis ATCC 29212 | > 10 colonie su Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti | Colonie blu-verdi con alone opaco |
| Listeria monocytogenesATCC 35152 + Escherichia coli ATCC 25922 + Enterococcus faecalis ATCC 29212 | > 10 colonie su Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti | Colonie blu-verdi con alone opaco |
Bibliografia
- Fraser J.A. and Sperber W.H. (1988)
- McClain D. and Lee W.H. (1988)
- ISO 11290 Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes.
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